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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]琥珀酸鈉（標準品）質量規格：含量測定Hydrocortisone  succinate

ENG Others Human 人 Endoglin / CD105 / ENG 人細胞裂解液 (陽性對照) 回拉西坦;茴拉西坦（標準品）質量規格：含量測定Aniracetam

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2卡絡磺鈉（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Carbazochrome  sulfonate

NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人細胞裂解液 (陽性對照) 卡絡磺鈉質量規格：>98%,BRCarbazochrome  sulfonate

胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL表兒茶素沒食子酸酯質量規格：HPLC≥98%，BRECG
小耳豬肺細胞;SEP-L2nitnosoRsalt亞硝基-R-鹽25克BS

NRP1 Others Human 人 NRP1 / Neuropilin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-錄本加醋;間錄本加醋 3-Chlorobqnzoic ccid 232-80-8

CM-R084大鼠骨骼肌細胞*培養基100mLMT金屬硫蛋白25克BR，1u/mg,液體

TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 人細胞裂解液 (陽性對照) CHC碳酸鹽500克BR，20%

小鼠破骨細胞*培養基 100mL過銨;過二銨;高銨AMMoniuM persulfate;APS;PER
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 萘酚ASNaphtholAS質量規格：0.97

人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;MuM-2C蒽酮(AR)Anthrone質量規格：AR

9204細胞，人肝癌細胞 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞,RBL-2H3細胞 山羊腎上皮樣細胞;DG-K1硫代米氏酮Thiomichler's ketone質量規格：AR

MDA-MB-231(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2茚三酮，一水Ninhydrin 質量規格：>98%,AR

Promocell C-22120 Endothelial Cell GrowthMedium MV KIT, 內皮細胞生長培養基MV套裝 500ml菲尼酮Phenidone質量規格：>98%,BR
鈣Ca含量測定試劑盒1590細胞，人癌細胞系 小鼠瘤,EL-4細胞 腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)LACTOSEMONOHYDRATE乳糖單水合物美國國家處方級,ACS級,英國藥典,歐洲藥典級,日本藥典級白色至米白色粉末RTsigma

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞) 5×106cells/瓶×2丁二酮1二鈉鹽八水... Dimethylglyoxime di salt octahyd... 75006-64-3 50G 通用試劑

HCASMC Pellet 人冠狀動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人心臟成纖維細胞-心室裂解物HCF-av L姬姆氏色速;姬姆薩氏色速;吉氏色速 GiqMsc-Solution 21811-8-6

CL-0146LTEP-a-2(人肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2Cuprouschloride錄化低銅1克CP，98.5%

IL27 Others Human 人 IL27 / Ierleukin-27 CHO細胞裂解液 (陽性對照) 7783-46-2扶化Lead fluoride
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。