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γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測(cè)試盒可見分光光度法

簡(jiǎn)要描述:γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測(cè)試盒可見分光光度公司正在出售的產(chǎn)品:Cary-Blair氏運(yùn)送培養(yǎng)基管 英文名稱:Cary-Blair Transport Medium 產(chǎn)品規(guī)格:20支/包 MEM維持液 英文名稱:MEM maintenance of fluid 產(chǎn)品規(guī)格:36支/盒 無(wú)菌生理鹽水管(內(nèi)附采樣棉簽) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支/包 Hanks氏病毒保存液(pH

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-29
  • 訪  問  量:1201

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測(cè)試盒可見分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測(cè)方法:可見分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6386

產(chǎn)品分類:
商品介紹:

測(cè)定意義:

γ-GTγ-谷氨酰循環(huán)中的關(guān)鍵酶,催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨?;衔锷系?/span>γ-谷氨?;D(zhuǎn)移到受體。也可以催化GSH和其他γ-谷氨?;衔锏乃猓a(chǎn)生谷鹽,在細(xì)胞外新陳代謝中起了重要的作用。

測(cè)定原理:

γ-GT催化谷氨酰對(duì)硝基苯胺中γ-谷氨?;D(zhuǎn)移給N-甘氨酰甘,生成對(duì)硝基苯胺,在405nm有特征光吸收;通過測(cè)定405nm光吸收增加速率,來計(jì)算γ-GT酶活性。

自備儀器和用品:

低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

50次 分枝桿菌RNAout  

2 ug pCMV5-300 pCMV5-300 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

檢定培養(yǎng)基 Test Medium 250g

100mg Poly r(A) Poly r(A)  -20℃保存

500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH7.6   Phosphate Buffer,0.2M, pH7.6   常溫保存

5nmol 接頭DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I接頭) Adaptors -20℃保存

2 ug pMW29 pMW29 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

knudson C 培養(yǎng)基 knudson C Medium 250g

1瓶 SW480細(xì)胞株 SW480 低溫運(yùn)輸和保存

WS瓊脂 WS Salmonella Agar 250g

25g 乙烯利 Ethrel   4℃保存

γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測(cè)試盒可見分光光度法AKT2  蛋白激B2 規(guī)格: 0.1ml

phospho-FRS2(Tyr436)  磷酸化成纖維細(xì)胞生因子受體底物2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Syndecan 2/heparin sulphate protoglycans 1  硫酸肝素糖蛋白1抗體抗體 規(guī)格: 0.2ml

NFEM5/IRF4/MUM1  淋巴細(xì)胞特異性干擾素調(diào)節(jié)因子抗體 規(guī)格: 0.2mlEpigen  上皮細(xì)胞有絲分裂蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CKMT/Creatine kinase MT  酸性型線粒體肌酸激抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-Goat IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit anti-MG IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlCCDC90A  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白90A抗體 規(guī)格: 0.2ml

KAT3B/Ep300  轉(zhuǎn)錄接蛋白EP300抗體 規(guī)格: 0.2mlCCDC124  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白124抗體 規(guī)格: 0.2ml

Collagen V  Ⅴ型膠原抗體 規(guī)格: 0.1mlBCAS2  相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗羊IgG 規(guī)格: 0.5mlADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor  alpha 1上素能受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Phospho-HSP27 (Ser254)  磷酸化熱休克蛋白27抗體 規(guī)格: 0.1mlNCE2  泛素結(jié)合E2F抗體 規(guī)格: 0.2ml

γ-Catenin  γ-連環(huán)素/連接蛋白γ抗體 規(guī)格: 0.2mlIGFR3/CD16  FC段γ受體3/免疫球蛋白G Fc段受體III抗體 規(guī)格: 0.1ml

Salmonella enteritidis/SE  腸沙門氏菌抗體 0.2mlTHRA1+2  甲狀激素受體α1+α2抗體 規(guī)格: 0.2ml 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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