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脂質(zhì)過氧化物(LPO)測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:脂質(zhì)過氧化物(LPO)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:乳糖莫能葡萄糖醛酸瓊脂 英文名稱:LMG Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g Tergitol-7瓊脂 英文名稱:Tergitol-7 Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g A1培養(yǎng)基 英文名稱:A1 Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g LesEndo瓊脂 英文名稱:m-Endo Agar,LES 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-28
  • 訪  問  量:975

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

脂質(zhì)過氧化物(LPO)測(cè)試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6411

商品介紹:

測(cè)定意義:

脂質(zhì)過氧化是動(dòng)植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質(zhì)過氧化物(LPO)是脂質(zhì)過氧化過程的產(chǎn)物,即ROS與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動(dòng)性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。因此,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學(xué)中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動(dòng)脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關(guān)。

測(cè)定原理:

LPO在酸性條件下加熱,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代酸(thiobarbituric acidTBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰。

需自備的儀器和用品:

分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

250mL Maleate Buffer(馬來酸緩沖液),0.2M,pH7.0  Maleate Buffer,0.2M,pH7.0  常溫保存

25OD 3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存

2 ug pMelBac B pMelBac B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

0.1mL×10 Origami B(DE3) plysS感受態(tài)細(xì)胞  Origami B (DE3) plysS Competent Cell -80℃保存

25g 多聚甲醛 Paraformaldehyde 密封干燥保存

50T 人FGFR3 1138G/A多態(tài)性檢測(cè)試劑盒(PCR-RLFP)  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

25 mg TMRE Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

500mL Carbonate Buffered Saline(鹽緩沖鹽水),5X,pH9.5  Carbonate Buffered Saline,5X,pH9.5  常溫保存

10mL 電泳級(jí)溴藍(lán)溶液 Bromophenol Blue Solution,EG 常溫避光干燥保存

2 ug pHANNIBAL pHANNIBAL 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基(EP) Sabouraud-dextrose Broth 250g

脂質(zhì)過氧化物(LPO)測(cè)試盒微量法Cyclooxygenase 1/COX1  前列素氧化環(huán)化1抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAP65/ASE 1  擬南芥MAP65蛋白抗體 0.2ml

Phospho-c-Fos(Thr232)  磷酸化c-fos抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

C3orf24  3號(hào)染色體開放閱讀框24抗體 規(guī)格: 0.2ml

BOLA1  BOLA1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

ARTS  凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號(hào)抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-A Raf(Ser214)  磷酸化A-Raf抗體 規(guī)格: 0.1ml

BRMS1  轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體 規(guī)格: 0.1ml

MuRF1/Trim63  肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接1抗體 規(guī)格: 0.1ml

SPINK1/SPINK3  瘤相關(guān)胰蛋白抑制劑1抗體 規(guī)格: 0.1ml

MARCH7/Axotrophin  膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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上海帛科生物技術(shù)有限公司 公司地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661 號(hào)24棟   技術(shù)支持:環(huán)保在線
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