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超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法

簡要描述:超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法公司正在出售的產品:葡萄糖銨培養基 英文名稱:Ammonium Dextrose Medium 產品規格:250g 葡萄糖半固體培養基 英文名稱:Dextrose Semisolid Medium 產品規格:250g 動力--尿素培養基基礎(MIU) 英文名稱:Motility Indol Urea Medium Base 產品規格:250g SIM培養基 英

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-28
  • 訪  問  量:626

詳細介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6461

商品介紹:

測定意義:

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

測定原理:

AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

50T 彈狀病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

30次 銀染清除劑 Silver Stain Erasol 常溫保存

2 ug SD1211-chip-Ctr SD1211-chip-Ctr 低溫運輸,-20℃保存

1次 96孔板質粒DNAout(真空法)  

2 ug pET-41b(+) pET-41b(+) 低溫運輸,-20℃保存

葡萄糖發酵管(軍團菌)  20支

2 ug pED-DsbA-pp-air pED-DsbA-pp-air 低溫運輸,-20℃保存

20個 雜交袋 Hybridization Bag 常溫

10次 一管式點突變試劑盒 One-Tube Mutagenesis Kit -20℃保存

100mL MOPS Buffer,0.5M,pH6.5   MOPS Buffer,0.5M,pH6.5   常溫保存

100次 古細菌+真細菌種屬鑒定 PCR Mix 3(rDNA) Bacterial DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法BRMS-1  轉移抑制基因1抗體 規格: 0.1ml

VMAT2  腦單胺類神經遞質轉運蛋白抗體 規格: 0.2ml

Syntrophins/SNTA1/Syntrophin Alpha1  神經肌肉接蛋白SNTA1抗體 規格: 0.2ml

Phospho-SMC1(Ser957)  磷酸化染色體結構維持蛋白質1抗體 規格: 0.1ml

HEY2  轉錄因子HEY2蛋白抗體 規格: 0.2ml

CCDC40  卷曲螺旋結構域蛋白40抗體 規格: 0.2ml

NIPP1/ARD1  核抑制蛋酸1抗體 規格: 0.2ml

RNF122  環指蛋白122抗體 規格: 0.2ml

CKLFSF2 isoform 1  趨化素樣因子超家族成員2亞型1抗體 0.2ml

TRIP  瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體 規格: 0.1ml

C4orf22  4號染色體開放閱讀框22抗體 規格: 0.2ml

p53 (FL-393)  瘤抑制基因p53抗體 規格: 0.2ml

 


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