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酰基轉移酶(AAT)測試盒可見分光光度法

簡要描述:酰基轉移酶(AAT)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產品:酪蛋白胨大豆吐溫20培養基 英文名稱:Casein DigestSoy LecithinPolysorbate 20 Medium 產品規格:250g 大豆-干酪素消化物瓊脂培養基 英文名稱:Tryposec Soya Agar Medium 產品規格:250g 大豆-干酪素消化物培養基 英文名稱:Tryposec Soya Modifi

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-26
  • 訪  問  量:701

詳細介紹

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱:酰基轉移酶(AAT)測試盒可見分光光度法

產品規格:25管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

產品貨號:BK-01S6644

產品分類:脂肪酸代謝系列
商品介紹:

測定意義:

AAT是一個多功能蛋白大家族,主要負責催化生物體內各種酰基化和去酰基化反應,在基因表達、代謝和信號傳導中具有重要作用。

測定原理:

AAT催化乙酰CoA轉移乙酰基到丁醇,釋放的CoA還原DTNB生成TNBTNB412nm有吸收峰,測定412 nm吸光度增加速率可計算AAT活性。

自備儀器和用品:

研缽、冰、臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

1000U 核酸內切 IV Endonuclease IV -20℃保存

2 ug pSUMO pSUMO 低溫運輸,-20℃保存

10mL 非多糖清除劑(RNA專用) PS Erasol(RNA) 4℃保存

2 ug pCMV-Tag 2A pCMV-Tag 2A 低溫運輸,-20℃保存

硝酸鹽肉湯 Nitrate Broth 250g

100g 二氫鉀 Potassium Dihydrogen Phosphate   室溫保存

50T 沙門氏菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

1 mg  LY 294002(PI3K抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250ml Glucose Veronal Buffer with EDTA(GVBE)   Glucose Veronal Buffer with EDTA(GVBE)   常溫保存

5mL 雪旺細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

2 ug pIRES2-DsRed-Express pIRES2-DsRed-Express 低溫運輸,-20℃保存

酰基轉移酶(AAT)測試盒可見分光光度法PCDH17  原鈣粘附蛋白17抗體 規格: 0.2ml

TRIM11/RNF92  環指蛋白92抗體 規格: 0.2ml

Mitochondrial ribosomal protein L11  線粒體核糖體蛋白L11抗體 規格: 0.2ml

FasL/CD178  兔抗FasL抗體。 規格: 0.1ml

RASAL1  RAS蛋白樣激活劑1抗體 規格: 0.2ml

Phospho-eIF2 alpha (Ser51)  磷酸化真核啟動因子2α抗體 規格: 0.1ml

phospho-CAMK2G (Ter286)  磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激CAMK2G抗體 規格: 0.1ml

PRODH  脯脫抗體 規格: 0.2ml

HBZ/Hemoglobin ζ  紅蛋白ζ鏈抗體 規格: 0.2ml

Phospho-Aurora B(Thr232)/Aurora C(Thr198)  磷酸化有絲分裂激B/C抗體 規格: 0.1ml

Serca2/SERCA2 ATPase  肌漿/內質網鈣ATP2抗體 規格: 0.1ml

GRM5/mGluR5  促代謝型谷受體5抗體 規格: 0.1ml 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

 


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