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肝脂酶(HL)測試盒微量法

簡要描述:肝脂酶(HL)測試盒微量法公司正在出售的產品:假單胞菌瓊脂培養基F 英文名稱:Pseudomonas Agar for Detection of Fluorescin 產品規格:250g 假單胞菌瓊脂培養基P 英文名稱:Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin 產品規格:250g 液體乳糖培養基 英文名稱:Fluid Lactose Me

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-26
  • 訪  問  量:758

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實質細胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內皮細胞表面和竇周間隙腔面的肝細胞微絨毛表面,可促進脂蛋白中的向類固醇激素轉化,血漿中的HL活性增高時,血漿中小顆粒可導致LDL水平升高,加速動脈粥樣硬化的發生。

測定原理

肝酯酶水解α-乙酸萘酯產生α-萘酚,可與固藍B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內與肝酯酶活性成正相關。

自備實驗用品及儀器

天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計、微量石英比色皿。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

肝脂酶(HL)測試盒微量法

100管/48樣

微量法

BK-01S6645

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實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

1%亞碲酸鉀溶液  5ml*10

1瓶 LII細胞株 LII 低溫運輸和保存

PBS-Tween20洗液 PBS-Tween20 lotion 250g

100mg 膠原Ⅲ型 Collagenase Type Ⅲ 4℃保存

250mL Succinate Buffer(琥珀酸緩沖液),0.2M,pH4.5  Succinate Buffer,0.2M,pH4.5  常溫保存

50次 液體樣品蛋白純化回收試劑盒 Liquid Sample Protein Purification Kit 常溫保存

2 ug psiRNA-hH1-neo psiRNA-hH1-neo 低溫運輸,-20℃保存

50gsu 人重組TFIIB rhTFIIB 4℃保存

2 ug pDNR1 pDNR1 低溫運輸,-20℃保存

改良CCD瓊脂添加劑 CCD Agar Additive 1ml*5

25g 豬膽鹽 Pig Bile Salts 室溫保存

肝脂酶(HL)測試盒微量法AU5 tag  AU5 tag標簽抗體 規格: 0.1ml

PAR4  蛋白活化受體4抗體 規格: 0.1ml

TBRG4  轉化生因子β調節蛋白4抗體 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗羊IgM 規格: 0.1ml

FBXL15  FBXL15蛋白抗體 規格: 0.2ml

EphB1/Eph receptor B1  酪蛋白激受體B1抗體 規格: 0.2ml

phospho-FOXO4 (Ser197)  磷酸化叉蛋白4抗體 規格: 0.1ml

SESN3  Sestrin3抗體 規格: 0.2ml

ZNF474/ZFP106  鋅指蛋白474抗體 規格: 0.1ml

TSPAN3  四分子交聯體3抗體(四旋蛋白) 規格: 0.2ml

C17orf57  17號染色體開放閱讀框57抗體 規格: 0.2ml

CCDC92  卷曲螺旋結構域蛋白92抗體 規格: 0.2ml

 


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