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土壤硝酸還原酶(SNR)測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:土壤硝酸還原酶(SNR)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:改良Camp-BAP氏瓊脂基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Camp-BAP Agar Base,Modified用于彎曲桿菌選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))250TTC 瓊脂基礎(chǔ) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)TTC Agar Base用于彎曲桿菌的TTC試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))250甘 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Glycine Medium用于彎曲桿菌甘耐受性試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))2

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2023-12-25
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:695

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱(chēng):土壤硝酸還原酶(SNR)測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6832

產(chǎn)品分類(lèi):土壤系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

S-NR催化土壤中硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,是土壤硝態(tài)氮還原的關(guān)鍵酶。研究S-NR的活性對(duì)合理施肥,降低氮素的損失具有重要意義。

測(cè)定原理

S-NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ +NADH+H→ NO2ˉ +NAD+H 2 O;產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下,與對(duì)氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物;生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰,可用分光光度法測(cè)定。

需自備的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

10g 脫氧膽酸鈉 Deoxycholic Acid,Sodium Salt                室溫干燥保存

50T 登革熱病毒Ⅲ、Ⅳ型PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50L Tricine-SDS-PAGE陰極電泳液(干粉) Tricine SDS-PAGE Anode Buffer 常溫保存

2 ug pYES3CT pYES3CT 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

50次 DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(λDNA/BstE II) DNAMETER(3) 4℃保存

1瓶 LA795(實(shí)體瘤)細(xì)胞株 LA795(實(shí)體瘤) 低溫運(yùn)輸和保存

改良麥康凱肉湯(CT-MAC) Modified MacConkey Broth 250g

1mg 梭菌蛋白 Clostripain 4℃保存

250mL Stripping Buffer 3,4X Stripping Buffer 3,4X 常溫保存

30次 一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒 One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit 4℃保存

2 ug pSIREN-RetroQ-DsRed-Express pSIREN-RetroQ-DsRed-Express 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

土壤硝酸還原酶(SNR)測(cè)試盒微量法ANKRD54  錨蛋白重復(fù)域54抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-EGFR (Tyr1068)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

FSTL1/FRP  卵泡相關(guān)蛋白1 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.3ml

PPP2R3A  蛋白質(zhì)磷酸2調(diào)節(jié)亞基3A抗體 規(guī)格: 0.2ml

HPCL2  植烷酰輔A羥化2抗體 規(guī)格: 0.2ml

ICOS/CD278  誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體 規(guī)格: 0.2ml

ITIH1  衍生透明質(zhì)酸相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Hepatitis C Virus NS5a  丙型毒NS5A抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-DES (Thr16)  磷酸化結(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml

phospho-ROCK1(Thr455/Ser456)  磷酸化Rho相關(guān)蛋白激1抗體 規(guī)格: 0.1ml 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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