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土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法

簡要描述:土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法公司正在出售的產品:YPD瓊脂 進口、國產Yeast Peptone Dextrose Agar用于測定酵母菌總數(GB標準)250抗生素檢定1號(高PH) 進口、國產Antibiotic Agar 用于鏈,卡那,慶大,紅等效價測定250抗生素檢定1號(低PH) 進口、國產Antibiotic Agar 用于磺芐青效價測定250抗生素檢定2號(高PH) 進

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-25
  • 訪  問  量:654

詳細介紹

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱:土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法

產品規格:100管/48樣

檢測方法:微量法

產品貨號:BK-01S6870

產品分類:土壤系列
商品介紹:

測定意義:

土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產物羥胺還原為氨,土壤中的還原態化合物可作為氫的供體,其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發損失,間接影響氮肥的利用效率。

測定原理

硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣,自身被還原為Fe2+Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物,在510nm處有吸收峰,羥胺還原酶作用于羥胺,使配合物形成量減少,510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

2 ug pLVPT-GDNF-rtTR-KRAB-2SM2 pLVPT-GDNF-rtTR-KRAB-2SM2 低溫運輸,-20℃保存

葡萄糖天門冬素 Glucose Asparagine Medium 250g

1瓶 NCI-H520細胞株 NCI-H520 低溫運輸和保存

雙料月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST)  250g

25g 鈉 Barbital Sodium 室溫保存

50T 阪崎腸桿菌rpsU-dnaG 基因間序列(78bp)常規PCR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存

100mL Bradford法蛋白定量試劑盒 Bradford Protein Assay Kit 常溫保存,BSA標準需要-20℃保存

2 ug pTRE-Tight-BI pTRE-Tight-BI 低溫運輸,-20℃保存

200次 柱式血液DNAout Column Blood DNAOUT 常溫

2 ug pECFP- ER pECFP- ER 低溫運輸,-20℃保存

CIN-1瓊脂平板9cm Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 10個/包

土壤羥胺還原酶(HR)測試盒微量法OGFOD1  末端多聚苷酸1蛋白抗體 規格: 0.2ml

KCND1/Kv4.1  電壓門控鉀通道Kv4.1抗體 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG/Gold  膠體金標記的兔抗小鼠IgG 規格: 0.5ml

AT1R/AGTR1  管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 規格: 0.1ml

CCNYL1  周期素樣Y1抗體 規格: 0.2ml

Quiescin Q6/QSOX1  巰基氧化1抗體 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG/HRP  辣根過氧化物標記的兔抗小鼠IgG 規格: 0.1ml

DIRC2  干擾細胞蛋白2抗體 規格: 0.2ml

Thymidylate synthase/TS  胸苷酸合成抗體 規格: 0.1ml

IHH  HHG2抗體 規格: 0.2ml

phospho-DDX58 (Ser8)  磷酸化DDX58抗體 規格: 0.1ml

Azurocidin/Cationic antimicrobial protein 37  肝素結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體 規格: 0.2ml 

 


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