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須毛癬菌LAMP試劑盒實驗要點

更新時間:2022-10-12      點擊次數:847

須毛癬菌LAMP試劑盒實驗要點:

1.CTAB 溶液在低于15℃時會析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預熱。

2.在最適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質,特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。

3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質變性,但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用ben酚和氯仿的混合液,可減輕這兩種現象,同時可加入適量的異戊醇(ben酚—氯仿—異戊醇=25:24:1),異戊醇的作用是消泡,并使蛋白質層緊密,使水相和有機相分層較好。 細菌的培養和收集 將含有質粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24 小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12 小時至對數生長后期。小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA 十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

操作流程:

1. 根據要保存的各樣本的體積,計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集2×106細胞RNAwait的用量是1ml。

2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中;

3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,立即*浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入,組織中間部位的RNA不能受到保護。較小的組織(如大鼠的腎臟、脾臟,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。

4. 保存時先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過夜(4℃過夜是必需的,這樣可使RNAwait*滲入到組織中),然后轉移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃時仍為液態,有結晶析出,是正常情況);或者在4℃冰箱過夜后,從RNAwait中取出組織塊,轉移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標本,反復凍融至室溫20次不影響RNA的質量。

重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標簽)

重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白

重組人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重組小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重組食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標簽)

重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標簽)

重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113, His 標簽)

重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標簽)

重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標簽)

重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標簽)

重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)

重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽)

重組小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽)

重組人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 標簽)

重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)

重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 標簽)

重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77)

重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標簽)

重組人 CXCL4 / PF4 蛋白

重組人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 標簽)



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