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通用型PCR檢測試劑盒的使用及效果

更新時間:2022-05-16      點擊次數:795
       通用型PCR檢測試劑盒利用離心柱內硅基質膜提取RNA,在反轉錄酶的作用下,以RNA為模板,以引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈。在TaqDNA聚合酶的作用下,經高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環。
  特點:
  1.使用改良型PCR染料,與熒光PCR兼容,此染料功能類似溴酚藍,擴增結束后無需添加上樣液及電泳指示染料即可直接電泳檢測。
  2.將Mg2+與含TaqDNA聚合酶的Mix分開,更加穩定。
  3.Mix中有一定比例的非Taq酶,擴增長片段的效率和靈敏度更高。
  4.方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR實驗。
  5.快捷,操作步驟已經限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
  6.產物可直接用于T載體克隆,不需要額外的加A反應。
  7.染料單獨提供,方便客戶組合。
  通用型PCR檢測試劑盒使用及效果:
  在無內毒素試管中,加入100uL細菌內毒素檢查用水、內毒素標準溶液,或待測樣品。再加入100uL鱟試劑溶液,混勻,37ºC溫育T1分鐘。溫育結束,加入100uL顯色基質溶液,混勻,37ºC溫育T2分鐘。溫育結束,加入500uL偶氮化試劑1溶液,混勻,加入500uL偶氮化試劑2溶液,混勻加入500uL偶氮化試劑3溶液,混勻,靜置5分鐘,于545nm波長處讀取吸光度值。
  內毒素標準范圍(EU/mL)為0.01-0.1,T1為60分鐘,T2為6分鐘;內毒素標準范圍(EU/mL)為0.1-1,T1為10分鐘,T2為6分鐘。

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